熒光分光光度計(jì)采用150W濱松高品質(zhì)氙燈和高性能光電倍增管，具有高檢測(cè)靈敏度、高測(cè)試速度、人性化的多功能控制和分析的操作軟件，高速掃描時(shí)1秒內(nèi)即可完成全譜掃描、計(jì)算和測(cè)量，其專(zhuān)業(yè)軟件包含多種分析功能，豐富的附件大大擴(kuò)展儀器的應(yīng)用范圍，可支持液態(tài)、粉末、薄膜樣品的測(cè)量，既可對(duì)產(chǎn)生熒光互淬滅的高濃度樣品實(shí)現(xiàn)測(cè)量，也可對(duì)少至5μl的微量樣品實(shí)現(xiàn)測(cè)量，并可配備自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)等等。

　　熒光強(qiáng)度容易受外界因素的影響，如樣品池、激發(fā)光源、溫度、溶液的pH值、溶劑性質(zhì)、其它溶質(zhì)、表面活性劑等都會(huì)造成熒光強(qiáng)度的變化。嚴(yán)格控制測(cè)試條件對(duì)熒光分析來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。

　?、贅悠窇?yīng)盛在四面透光的石英比色皿（熒光池）中，如果是揮發(fā)性樣品應(yīng)使用帶塞的熒光池。

　?、谠跓晒夥治鰰r(shí)，為了得到穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù)，一般需要開(kāi)機(jī)預(yù)熱氙燈大約30min。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈，預(yù)熱時(shí)間可以縮短到10min左右。對(duì)某些易感光、易分解的熒光物質(zhì)，盡量采用長(zhǎng)波長(zhǎng)、低人射光強(qiáng)度及短時(shí)間光照。

　　③溫度變化可引起熒光強(qiáng)度的改變。通常降低溫度，有利于提高熒光量子產(chǎn)率，熒光強(qiáng)度增大。溫度影響熒光強(qiáng)度的顯著程度因樣品而異，大部分熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度受溫度影響不大，測(cè)試溫度變化不超過(guò)±3℃，對(duì)測(cè)試結(jié)果幾乎無(wú)影響。

　?、墚?dāng)熒光物質(zhì)是弱酸或弱堿時(shí)，溶液的pH對(duì)熒光強(qiáng)度有較大影響。因?yàn)槿跛峄蛉鯄A在不同酸度中，分子和離子的電離平衡會(huì)發(fā)生改變，而熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度會(huì)因其離解狀態(tài)發(fā)生改變。以苯胺為例：在pH=7～12的溶液中會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色熒光，在pH<2或ph>13的溶液中都不產(chǎn)生熒光。再如，維生素B2（核黃素）在430～440nm藍(lán)光照射下會(huì)發(fā)出綠色熒光，λem為535nm。它在pH=6～7的溶液中熒光強(qiáng)度最大，而在pH=11時(shí)熒光消失；但在堿性溶液經(jīng)光線照射發(fā)生分解作用或在酸性KMn04氧化下都會(huì)生成熒光強(qiáng)度比維生素B2強(qiáng)得多的黃光素，并可溶于氯仿。利用此性質(zhì)可提高測(cè)定的靈敏度和選擇性。

　　⑤分子結(jié)構(gòu)中存在π-π共軛的熒光物質(zhì)在極性溶劑中，熒光效率顯著增強(qiáng)。溶液中表面活性劑的加入能夠顯著提高熒光強(qiáng)度。

　　⑥瑞利散射和拉曼散射是溶劑的兩種散射光，應(yīng)注意不要誤把瑞利散射和拉曼散射光譜當(dāng)做熒光光譜。瑞利散射光波長(zhǎng)與激發(fā)光波長(zhǎng)相同，拉曼散射與激發(fā)光波長(zhǎng)不同，而熒光物質(zhì)的熒光波長(zhǎng)與激發(fā)光波長(zhǎng)無(wú)關(guān)，因此可以通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)波長(zhǎng)將拉曼散射光與熒光分開(kāi)。在測(cè)試時(shí)選擇合適的狹縫寬度，或者空白扣除，也可以對(duì)散射光的影響進(jìn)行校正。

　　⑦熒光物質(zhì)分子與溶液中其它物質(zhì)分子之間作用導(dǎo)致熒光強(qiáng)度降低，常見(jiàn)的熒光猝滅劑，如鹵素離子、重金屬離子、硝基化物質(zhì)、重氮化合物等。溶液中的溶解氧也能引起幾乎所有的熒光物質(zhì)產(chǎn)生不同程度的熒光熄滅現(xiàn)象，因此，在較嚴(yán)格的熒光實(shí)驗(yàn)中必須除02。

　　⑧測(cè)試過(guò)程中注意不要肉眼盯著氙燈光源看，以防對(duì)眼睛造成損傷。

　?、醿x器房應(yīng)注意經(jīng)常通風(fēng)，避免產(chǎn)生的臭氧在室內(nèi)富集。